酶底物法封口机检测优势
1.无需在无菌室内操作。
2.手工操作时间小于1分钟。
3.无需培养基制备和大量玻璃器皿灭菌。
4.24小时即可完成定性定量分析,无需验证试验。
操作方法
一:将水样加入100ml取样瓶中,加入酶底物法检测试剂,拧紧盖子摇匀至完全溶解。
二:将样品加到定量检测盘中。
三:使用程控定量封口机对定量检测盘进行样品分配及封口。
四:将封口好的定量检测盘放在36±1℃,如需测定粪大肠菌群(耐热大肠菌群)则将培养箱设定为44.5℃,培养24h。
五:对照比色盘数阳性(显黄色,或荧光)格子数,按照使用的检测盘类型,分别查51孔或者97孔MPN表得出100毫升中大肠菌群的菌群数,对照MPN表出数据。
六:根据稀释倍数结果按公式计算结果大肠菌群(个/L)=MPN值×稀释倍数×1000mL/100mL。
水质大肠菌群酶底物法检测系统:由LK-2010国产程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物检测试剂四部分组成。检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、用水等。初发酵试验1、水样稀释:制备水样10-1、10-2的稀释液,方法为用无菌移液管吸取水样10mL放于盛有90mL无菌水和若干玻璃珠的锥形瓶中,充分振荡使混合均匀,并使其中的细菌尽量呈单个存在,即为10-1稀释液;再从10-1制备10-2稀释液。以此类推,稀释到所需倍数。2、接种和培养:以无菌操作于5支三倍浓缩培养基(接种前一定应先检查杜汉氏小管内有无气泡)中各加入水样10mL,5支普通培养基试管中加入水样1mL,5支普通培养基试管中加入10-1稀释液1mL, 小心混匀放入37℃培养箱中培养24h 。此即5管法。3、结果观察:37℃中培养24h后取出观察,观察有无气体(杜汉氏小管内有无气体)和酸产生(培养基有无变色)。在48h之间,培养管内倒置的杜汉氏小管内有任何量的气体积累,或培养基颜色从紫色变为黄色,便可初步断定为阳性反应。
程控定量封口机常见问题故障及对应解决方法程控定量封口机常见问题故障及对应解决方法
酶底物法检测大肠菌群实际操作方便快捷,假阳性低,结果准确,是GB5750-2006生活饮用水卫生标准检验方法中检测大肠菌群的规范方法,作为此方法中关键的配套仪器——程控定量封口机,在实验中是要经常使用的。而仪器设备在使用过程中,由于操作等问题,免不了会出现一些故障,从而影响到实验的进行。
平板计数法(tecount):该方法是统计物品含菌数的有效方法,操作的顺序是首先将样本进行适当稀释,使其中的微生物充分分散成单个细胞,取定量的稀释液进行培养使其逐渐生长成肉眼可观察的菌落,然后通过稀释度和样本数量来计算菌数。但是,由于待测样品往往不宜完全分散成单个细胞,所以,长成的一个单菌落也可能来自样品中的2~3或更多个细胞,因此平板菌落计数的结果往往偏低。